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iDPC-STEM在生物树脂超薄切片样品中的应用
材料人客服小谭     2022-02-16 微信扫码分享 登录后可收藏  
应用场景:
生物医用检测
关键性能:
将iDPC-STEM技术应用于化学固定和树脂包埋的生物组织切片样品中,研究了不同的电子剂量,不同的染色条件,不同的样品厚度下TEM和iDPC-STEM图像衬度和信噪比的差异
产品介绍:

据中科院生物物理研究所官网报道,中国科学院蛋白质科学研究平台生物成像中心与赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific) 合作报道了一种新型的扫描透射电镜成像技术-积分差分相位衬度成像(integrated differential phase contrast)在生物样品中的应用,这是该技术在生物树脂超薄切片中的首次探索。研究者首次将iDPC-STEM技术应用于化学固定和树脂包埋的生物组织切片样品中,研究了不同的电子剂量,不同的染色条件,不同的样品厚度下TEM和iDPC-STEM图像衬度和信噪比的差异。在电子剂量为1 e-/Å2, 3 e-/Å2, 6 e-/Å2, 10 e-/Å2, 20 e-/Å2 和40 e-/Å2时,通过与常规TEM图像比较,发现相同的电子剂量条件下iDPC-STEM不仅显示了更好的衬度,而且在极低剂量的条件下,在分子水平上iDPC-STEM可以展示更多的结构细节。研究者还尝试了不同的染色条件,分别为切片样品常规染色和去除后染色中的铅染和铀染,结果显示在更少的染色条件下,iDPC-STEM获得了更好的衬度、更高的信噪比(SNR)和超微结构细节。对于厚样切片,研究者选用了200 nm,400 nm和600 nm三种不同的切片厚度,发现iDPC-STEM对于厚样品尤其有利,原因在于iDPC-STEM中避免了TEM中的衬度反转抵消效应以及非弹性散射和多重散射产生的噪音的影响,通过调整焦深,完全保留了结构细节与样本的衬度。他们还比较了TEM,iDPC-STEM和ABF-STEM,发现iDPC-STEM在保持高频生物结构细节的同时,在较低的频域得到了适度的改善,图像衬度得到了进一步的提高。研究结果表明,iDPC-STEM在未来的结构生物学研究中具有潜在的巨大的优势,如将iDPC-STEM技术应用于电子断层成像,由于可以实现低剂量高衬度成像,可以在低剂量下减少对样品的辐照损伤,获得更多倾斜角度的信息,同时结合depth-section技术,将实现xyz方向的高分辨率,大尺度成像。研究成果在Journal of Structural Biology杂志在线发表了题为Imaging biological samples by integrated differential phase contrast (iDPC) STEM technique的文章。

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